Roztwory soli są powszechne, gdy mówimy o biologii komórkowej lub biochemii. Głównie podczas eksperymentów potrzebne są roztwory soli. Dwa popularne roztwory soli to PBS i HBSS. Do ich uzyskania używa się pewnych składników i chemikaliów. Mimo, że oba są umieszczone na szalkach Petriego z komórką, nadal różnią się między sobą.
PBS kontra HBSS
Różnica między PBS i HBSS polega na tym, że roztwór soli fizjologicznej PBS jest używany w eksperymentach biochemicznych i biologii molekularnej, podczas gdy HBSS jest używany w ogólnych badaniach biologicznych. Chociaż oba są solankowe i pomagają utrzymać neutralne pH, są one wykonane z różnych składników.
PBS oznacza sól fizjologiczną buforowaną fosforanem. Jest to buforowy roztwór soli na bazie wody, który pomaga w utrzymaniu stałego poziomu pH w próbce. Poziom pH tego roztworu wynosi około 7,4. PBS ma charakter izotoniczny i nie jest toksyczny dla większości komórek.
HBSS oznacza zrównoważony roztwór soli Hanka. Jest to płynny lub sproszkowany roztwór używany do utrzymania osmolalności i pH w zastosowaniach biologicznych. Odpowiadają również za krótkotrwałe utrzymanie komórek poza pożywką wzrostową. HBSS składa się z kilku elektrolitów, które znajdują się w przedziałach wewnątrzkomórkowych i zewnątrzkomórkowych.
Tabela porównawcza między PBS i HBSS
| Parametry porównania | PBS | HBSS |
| Oznacza | Sól fizjologiczna buforowana fosforanem | Zbilansowany roztwór soli Hanka |
| Składniki | NaCl, KCl, Na2HPO4, KH2PO4. | Sole nieorganiczne, glukoza lub pirogronian, czerwień fenolowa i wodorowęglan sodu. |
| Formularze | Wykonane wyłącznie w postaci płynnej. | Może być wykonany zarówno w postaci płynnej, jak i sproszkowanej. |
| Temperatura przechowywania | 15-30 stopni Celsjusza | 4-8 stopni Celsjusza. |
| Aplikacje | mycie komórek, transport tkanek, rozcieńczanie komórek i przygotowywanie odczynników. | Hodowla komórek ssaków, nośniki transportowe |
Co to jest PBS?
PBS oznacza sól fizjologiczną buforowaną fosforanem. Jest to buforowy roztwór soli na bazie wody, który pomaga w utrzymaniu stałego poziomu pH w próbce. Poziom wody i stężenie jonów w roztworach PBS są dopasowane do ludzkiego organizmu, co oznacza, że roztwory PBS mają charakter izotoniczny.
Ponieważ roztwory PBS nie są toksyczne dla komórek, mają wiele zastosowań, w tym rozcieńczanie substancji i oddzielanie zbitych komórek itp. W ostatnich latach roztwory PBS cieszyły się dużym zainteresowaniem, ponieważ są używane jako alternatywa dla nośników transportu wirusów do przechowywania RNA wirusy, w tym SARS-CoV-2 lub Corona Virus.
Rozwiązanie PBS można wykonać różnymi metodami. Jeśli bufor jest używany na żywej tkance, preparat wymaga chlorku potasu lub chlorku magnezu, natomiast jeśli bufor jest używany na tkance utrwalonej, nie jest wymagany ani chlorek potasu, ani chlorek magnezu. Podczas przygotowywania poziom pH można regulować za pomocą kwasu solnego lub wodorotlenku sodu.
Najczęstsze składniki roztworu PBS to NaCl, KCl, Na2HPO4, i KH2PO4 w precyzyjnie obliczonych ilościach. Roztwory PBS można również przygotować przy użyciu dostępnych na rynku tabletek lub kapsułek buforowych PBS. Roztwory PBS są przechowywane w temperaturze pokojowej lub w lodówce.
Co to jest HBSS?
HBSS oznacza zrównoważony roztwór soli Hanka. Ten roztwór został nazwany na cześć biologa Johna H. Hanksa, który sformułował je w 1940 roku. Ten roztwór jest używany jako system buforowy w hodowli komórkowej i pomaga w utrzymaniu optymalnego poziomu pH lub wzrostu komórek. Optymalne wartości pH wahają się od 7,0 do 7,4.
Ponieważ roztwory HBBS zawierają glukozę i wodorowęglan sodu, są używane do krótkotrwałego utrzymania komórek poza pożywką wzrostową. Roztwory te są również wykorzystywane do różnych zastosowań w hodowli komórek, takich jak płukanie komórek, transportowanie komórek lub rozcieńczanie komórek. Roztwory HBSS utworzone z wapniem i magnezem są używane jako media transportowe lub do przygotowania odczynników.
Roztwór HBSS przygotowuje się ze sproszkowanej pożywki podstawowej połączonej z wodą tkankową o czystości hodowlanej. Powszechnymi składnikami roztworu HBSS są sole nieorganiczne, glukoza lub pirogronian, czerwień fenolowa i wodorowęglan sodu. Po przygotowaniu próbki roztworów HBSS są testowane w celu potwierdzenia braku zanieczyszczenia bakteryjnego lub grzybiczego
Roztwory HBSS są delikatne i są dostarczane w napromieniowanych promieniami gamma, sterylnych butelkach. Roztwory HBSS są przechowywane w niskiej temperaturze 4-8 stopni Celsjusza i z dala od bezpośredniego światła. Są również bardziej niebezpieczne w wytwarzaniu w porównaniu z roztworami PBS, ponieważ komórki ludzkie zawierają materiały stanowiące zagrożenie biologiczne.
Główne różnice między PBS a HBSS
Wniosek
Zarówno PBS, jak i HBSS to roztwory soli stosowane głównie w biologii molekularnej, eksperymentach biochemicznych oraz do badań leków biologicznych. Podczas przeprowadzania eksperymentu oba roztwory umieszcza się na szalce Petriego z komórką lub tkanką. Roztwór utrzymuje komórki podczas badania lub do wykorzystania podczas eksperymentu. Chociaż oba są oddzielnymi roztworami soli, można je również stosować zamiennie w sprzyjających warunkach. Jednak w takich przypadkach, jeśli próbka jest potrzebna w postaci sproszkowanej, wówczas pobierany jest roztwór HBSS, ponieważ roztwór PBS jest tylko w postaci płynnej.
PBS jest najczęściej przygotowywany w laboratoriach, ponieważ skład składników można zmieniać w razie potrzeby, a także jest to bezpieczne, ponieważ roztwór PBS nie wpływa szkodliwie na komórki. Z drugiej strony roztwór HBSS jest preferowany bezpośrednio z rynku, ponieważ przygotowanie go w laboratorium jest niebezpieczne ze względu na jego delikatność i możliwe zanieczyszczenie bakteriami lub grzybami. Co więcej, osiągnięcie korzystnych warunków wymaga więcej zasobów, ponieważ można go przechowywać tylko w niskiej temperaturze.
Chociaż podstawowe przeznaczenie obu tych roztworów soli fizjologicznej jest takie samo, wymagania PBS wzrosły w ciągu ostatnich kilku lat, ponieważ może on być używany jako wirusowe medium transportowe do przechowywania wirusów RNA, w tym wirusa Corona.
